HS Taq ДНК-полимераза

- "Горячий старт" в первом цикле денатурации
- Экзонуклеазная активность 5’ → 3’
- Размер ампликонов до 5 тыс. п.о.

HS Taq ДНК-полимераза представляет собой смесь рекомбинантного фермента Taq ДНК-полимеразы и моноклональных антител. Наличие "горячего старта" существенно повышает чувствительность и специфичность реакции по сравнению с Taq полимеразой. Область применения - Амплификация ДНК в рутинных аналитических исследованиях - Мультиплексная ПЦР - ПЦР в режиме реального времени (TaqMan, интеркалирующие красители)

HS Taq ДНК-полимераза неактивна в условиях приготовления реакционной смеси. Активация фермента происходит в течение первой денатурации. При температуре более +70 °С комплекс ДНК-полимеразы с антителом диссоциирует.

Полимераза комплектуется стандартным 10Х Taq буфером или высокоэффективным 10Х Taq Turbo буфером. При необходимости можно дополнительно заказать реакционный буфер без магния.

Длина фрагмента, который возможно амплифицировать с помощью HS Taq ДНК-полимеразы, зависит от природы и качества ДНК-матрицы. В оптимальных условиях она может достигать 5 тыс.п.о.

Амплифицированные продукты имеют на концах выступающие дезоксиаденозиновые остатки, что позволяет использовать ПЦР-продукт для клонирования в Т-векторы (pAL2-T или pKAN-T).

Основные свойства HS Taq ДНК-полимеразы

1. Быстрый "горячий старт" в первом цикле денатурации (95 °С, 5-10 сек)
2. Температурный оптимум активности 70-74 °С
3. 5’ → 3’ экзонуклеазная активность
4. Накопление продукта ПЦР происходит быстрее, по сравнению с химически модифицированными полимеразами
5. Возможность клонирования продуктов ПЦР в Т-векторы (pAL2-T или pKAN-T) за счет выступающих на концах амплифицированных фрагментов ДНК дезоксиаденозиновых остатков.

	Сравнение специфичности и эффективности амплификации геномной ДНК человека с помощью Taq ДНК -полимеразы и HS Taq ДНК -полимеразы. А - фрагмент гена KIR длиной 1600 п.о. Б - фрагмент LINE-последовательности длиной 240 п.о. 30 циклов ПЦР, 5 нг ДНК матрицы на старт. Дорожка М – маркер 1 kb DNA Ladder.

Подбор реакционного буфера

• Для большинства приложений ПЦР рекомендуется использовать Taq Turbo буфер (особенно в случае GC-богатых ампликонов). При необходимости оптимизировать концентрацию ионов магния в реакции, можно отдельно заказать Taq Turbo буфер без Mg²⁺.
• Применение стандартного Taq буфера допустимо, если увеличение эффективности ПЦР может привести к появлению неспецифического продукта, а также для реакций, в которых условия ПЦР были ранее оптимизированы под использование Taq буфера. При необходимости можно отдельно заказать Taq буфер без Mg²⁺.
• Более подробно о реакционных буферах: см. Буферы для Taq и HS Taq ДНК-полимераз.

Результат амплификации GC-богатого фрагмента плазмиды в Taq Turbo буфере (красным) и Taq буфере (зеленым). Длина фрагмента 490 п.о. Интеркалирующий краситель EvaGreen®. На старте ПЦР использовали 5, 0.5 и 0.05 нг плазмидной ДНК, 4 технических повторности каждой точки.

Результат амплификации фрагмента гена hGAPD (211 п.о.) с использованием TaqMan зонда в Taq буфере (синим) и Taq Turbo буфере (красным). На старте ПЦР использовали 50, 7 и 1 нг геномной ДНК.

ПРОДУКТ	КАТ.#	КОМПОНЕНТЫ НАБОРА	КОЛИЧЕСТВО	ЦЕНА, РУБ.	ИНСТРУКЦИЯ (PDF)
Цены указаны с учетом НДС. Стоимость доставки рассчитывается отдельно. Для заказов с суммой менее 10 тыс.руб. также отдельно рассчитывается стоимость оформления договора (заключается по запросу заказчика). Продукты предназначены только для научно-исследовательских целей.
HS Taq ДНК-полимераза	PK017S	HS Taq ДНК-полимераза (5 ед./мкл), 100 мкл 10X Taq Turbo буфер, 1.5 мл	400 р-ций по 25 мкл
	PK017L	HS Taq ДНК-полимераза (5 ед./мкл), 5 x 100 мкл 10X Taq Turbo буфер, 5 x 1.5 мл	2000 р-ций по 25 мкл
	PK017H	HS Taq ДНК-полимераза (5 ед./мкл), 10 x 100 мкл 10X Taq Turbo буфер, 10 x 1.5 мл	4000 р-ций по 25 мкл
	PK017B	HS Taq ДНК-полимераза Реакционный буфер	НА ЗАКАЗ*
HS Taq ДНК-полимераза + смесь dNTP	PK018	HS Taq ДНК-полимераза (5 ед./мкл), 5 x 100 мкл 10X Taq Turbo буфер, 5 x 1.5 мл 50X dNTP для ПЦР (10 мМ каждого), 5 x 200 мкл	2000 р-ций по 25 мкл

* Минимальный объем полимеразы, изготавливаемый по индивидуальному заказу: 5 мл, шаг – 1 мл

Возможно приобрести дополнительно

развернуть

ПРОДУКТ	КАТ.#	ОПИСАНИЕ	КОЛИЧЕСТВО	ЦЕНА, РУБ.	ИНСТРУКЦИЯ (PDF)
Цены указаны с учетом НДС. Стоимость доставки рассчитывается отдельно. Для заказов с суммой менее 10 тыс.руб. также отдельно рассчитывается стоимость оформления договора (заключается по запросу заказчика). Продукты предназначены только для научно-исследовательских целей.
Геномная ДНК человека	NA101	Геномная ДНК из клеточной линии человека Raji (концентрация 100 мкг/мл)	10 мкг, 100 мкл
Фрагментированная геномная ДНК человека	NA102	Фрагментированная геномная ДНК из клеточной линии человека Raji (концентрация 100 мкг/мл)	10 мкг, 100 мкл
Геномная ДНК крысы	NA201	Геномная ДНК крысы из клеточной линии C6, 100 мкг/мл. Для контроля при ПЦР, Саузерн-блот гибридизации или конструирования геномных ДНК-библиотек.	10 мкг, 100 мкл
MgCl2	PB005	Раствор MgCl2 (концентрация 50 мМ)	5 мл (5 x 1 мл)
Смесь dNTP (10 мM каждого)	PB006S	Смесь dNTP предназначена для использования в ПЦР, реакциях обратной транскрипции и любых других приложениях, требующих синтеза ДНК	200 мкл, 2 мкмоль
	PB006L		2 мл (10 x 200 мкл), 20 мкмоль
Смесь dNTP (2 мM каждого)	PB032		5 мл, (5 x 1 мл), 2 мкмоль
Набор dNTP (100 мM)	PB033	Набор dNTP состоит из 4-х пробирок высокоочищенных дезоксинуклеотидов (dATP, dTTP, dGTP, dCTP). Концентрация каждого — 100 мМ.	4 х 250 мкл, 25 мкмоль каждого
Раствор dUTP (100 мМ) Новинка!	PB034	Для использования в ферментативных реакциях синтеза ДНК, где требуется полная или частичная замена dTTP (в том числе для контроля контаминации реакции).	100 мкл, 10 мкмоль
Вода деионизированная, свободная от нуклеаз Новинка!	PB207S	Деионизированная вода высокой очистки для подготовки реакционных смесей для ПЦР, реакциий обратной транскрипции, рестрикции, а также любых ферментативных реакций	7.5 мл (5 х 1.5 мл)
	PB207M		50 мл
	PB207L		1 л
50Х SYBR Green I для ПЦР-РВ	PB025S	Готовый к применению 50Х раствор для добавления в реакционную смесь для ПЦР с детекцией в режиме реального времени (ПЦР-РВ)	0.1 мл, 200 р-ций по 25 мкл
	PB025M		0.5 мл (5 х 0.1 мл), 1 000 р-ций по 25 мкл
10X Taq Turbo буфер	PB001	Высокоэффективные буферы для Taq и HS Taq ДНК-полимераз	3 000 р-ций объемом 25 мкл
10X Taq Turbo буфер (без Mg2+)	PB002		3 000 р-ций объемом 25 мкл
5X Taq Red буфер	PB003		1 500 р-ций объемом 25 мкл
5X Taq Red буфер (без Mg2+)	PB004		1 500 р-ций объемом 25 мкл